最新发布 | 专家共识推荐mNGS用于感染性眼病诊断


发布日期:2022/03/23

感染性眼病是临床常见的眼部疾病,由于其结构的特殊性,大多数医疗机构对感染性眼病实验室诊断能力不足,导致感染性眼病的病原学诊断成为难点。为切实提高我国感染性眼病治水平,北京医学会检验分会通过临床验证,形成了《感染性眼病的病原微生物实验室诊断专家共识》。本文特摘录《共识》部分重点内容,以飧读者。


在实验室诊断过程中,检验医师需清楚地了解样本来源及患者临床表现,以便对眼各个部位可能存在的病原体及不同类型眼部感染可能相关的微生物作出初步判断。

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参考2018年美国微生物实验室操作指南、2021年美国眼部感染临床微生物实验室实用指南以及2021年欧洲微生物手册制定如下规则。

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实验室检查

1、刮片细胞微生物学检查

对于感染性眼病实验室诊断,除睫毛螨虫、阴虱或结膜吸吮线虫外,在培养、核酸及免疫学检测之前均应进行细胞微生物学检查,强调从病理学角度重视眼部刮片细胞学检查。

2、传统微生物培养

眼部微生物常规培养包括需氧、兼性厌氧、厌氧及真菌培养等,必要时可增加微需氧及分枝杆菌培养。

3、棘阿米巴培养及鉴定

棘阿米巴性角膜炎多由棘阿米巴原虫感染所致,偶有耐格里属感染的报道。角膜棘阿米巴原虫的培养常规选择Page非营养琼脂培养基,小刀片切取一片表面琼脂,在显微镜的油镜下观察,可清晰分辨出棘阿米巴滋养体和包囊的形态、结构。

4、核酸检测

对于眼部无菌标本,常规检验无法满足实验室诊断时,可选择宏基因组下一代测序技术(metagenomics next generation sequencing,mNGS)。该技术的无偏倚性使其成为未知病原体识别的重要手段。有研究表明mNGS诊断眼内炎的敏感度为88%,在鉴定未知低丰度微生物时,mNGS灵敏度优于其他方法。尽管mNGS存在局限性,但目前仍是眼科难培养病原体的检测手段之一。

5、免疫学检测

血清、房水、玻璃体液及泪囊分泌物均可进行病原体(包括疱疹病毒、巨细胞病毒、弓形虫、梅毒)特异性抗体和总IgG检测,方法包括酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫荧光法(immunofluorescence assay,IFA)及免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)等。


免疫学检查多为定性试验,需注明方法学类型。特异性核酸扩增有qPCR和定性PCR,按说明书要求报告。mNGS对常规检查阴性的病原微生物有诊断价值,条件致病菌应在微生物专家指导下解读。


眼科医生在申请检查项目前应全面评估眼部病变情况,根据临床拟诊选择染色及培养方法。实验室应建立满足眼科病原体检验技术平台,除传统培养外应具备核酸、抗体和特殊染色的检测方法,补充病毒、非典型病原体及寄生虫等检查内容。常用抗菌药物敏感试验折点并不适合眼科局部用药,多数情况仍需依靠医生经验或结合当地流行病学数据。


参考文献

北京医学会检验分会.感染性眼病的病原微生物实验室诊断专家共识[J].中华检验医学杂志,2022,45(01):14-23.

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